As bactérias Gram-positivas são aquelas que estão coloridas de azul escuro ou violeta pela coloração Gram-positiva. Isto contrasta com as bactérias gram-negativas, que não conseguem segurar a coloração violeta cristalina. Em vez disso, elas absorvem a contra-mancha (safranina ou fuchsine) e parecem vermelhas ou cor-de-rosa.
A diferença é causada pela estrutura da parede celular. Os organismos gram-positivos possuem espessa camada de peptidoglicano. Isto os protege, de modo que não precisam de paredes celulares rígidas. Por outro lado, as bactérias gram-negativas têm camadas finas e insignificantes de peptidoglicanos, de modo que elas precisam de paredes celulares rígidas para suporte e proteção.
